产品货号：
M20257
中文名称：
O-糖苷酶
英文名称：
O-Glycosidase
产品规格：
1kU
发货周期：
1～3天
产品价格：
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O-Glycosidase具有高度特异性，可从丝氨酸、苏氨酸残基或者作为糖肽或糖蛋白的一部分释放Galβ1-3GalNAc。应用于糖蛋白的生物合成分析，O-聚糖的生物活性蛋白质O-糖基化检测和结合位点分析。
| 组分 | 规格 |
| O-Glycosidase | 1kU |
| 10×Glycoprotein Denaturing Buffer | 1mL |
| 10×GlycoBuffer 2 | 1mL |
保存：-20℃，有效期1年。
| 来源 | 大肠杆菌 |
| 标签 | N-terminal His Tag |
| 分子量 | 180kDa |
| 贮存液 | Supplied lyophilized，20mM Tris-HCl，200mM NaCl(pH7.5) |
| 酶活 | ≥10000U/mg |
| 酶活定义 | 一个单位定义为在37℃，pH5.5条件下，每小时催化1nmol Gal β1-3GalNAcα1–Thr释放所需的酶量。 |
- 体系放大时，孵育时间和酶量需要根据实际情况调整，低速震荡混匀可以提高转化率。
- 本制品仅限于专业人员的科学研究，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。
- 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 使用前准备
将O-Glycosidase试剂取出，加入30～50μL ddH2O溶解，10000rpm离心10s，确保所有试剂都在管底。其他缓冲液从-20℃冰箱中取出待用。 - 变性条件下糖蛋白去糖基化
- 用ddH2O溶解1～20μg的糖蛋白，加入1μL的10×Glycoprotein Denaturing Buffer，用ddH2O定容至10μL，75℃孵育10min。
- 加入2μL的10×GlycoBuffer 2和2μL的10% NP-40，轻轻混匀。
- 加入1～4μL的O-Glycosidase，加ddH2O至20μL，轻轻混匀，37℃孵育1～4h。
- 用于SDS-PAGE分析或HPLC分析。
- 用ddH2O溶解1～20μg的糖蛋白，加入1μL的10×Glycoprotein Denaturing Buffer，用ddH2O定容至10μL，75℃孵育10min。
- 非变性条件下糖蛋白去糖基化
- 取10～100μg糖蛋白溶液，加入2μL 10×Glyco缓冲液和2～5μL O-Glycosidase，补加ddH2O使得反应体系总体积为20μL，轻轻混匀。
- 37℃条件下反应4～24h。
- 当对天然糖蛋白去糖基化时，建议将等量糖蛋白样品进行变性后再同步进行酶切实验作为阳性对照，以确定非变性条件下去糖基化反应的程度。
- 取10～100μg糖蛋白溶液，加入2μL 10×Glyco缓冲液和2～5μL O-Glycosidase，补加ddH2O使得反应体系总体积为20μL，轻轻混匀。
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